Total Hemocyte Count (THC), Kadar proPO dan PO Pasca Ablasi Tangkai Mata Pada Crustacea

Ablasi tangkai mata pada kepiting Potamon persicum memicu peningkatan yang signifikan terhadap nilai Total Hemocyte Count (THC) pada akhir minggu kedua dan ketiga ablasi (Khazraeenia dan Khazraiinia 2009). Rata-rata THC pada kepiting utuh (tidak diablasi) pada minggu ke 0 adalah 3.921 ± 103. Tidak ada perbedaan yang nyata antara THC dari kepiting yang diablasi (4.096 ± 147) dan kontrol (3.916 ± 153) terjadi pada minggu 1, meskipun ini tidak signifikan (p> 0,05). THC dari kepiting yang diablasi adalah 4.449 ± 165 pada minggu ke 2 dan 5273 ± 190 pada 3 minggu, nyata meningkat jika dibandingkan dengan kelompok kontrol pada minggu ke 2 (3.913 ± 152) dan minggu 3 (3.917 ± 151; p <0,05; Gambar 1.).

Gambar 1. Total hemocyte count (THC) per mm3 hemolymph pada kepiting

         Pada crustacea, aktifitas hemopoietic dibawah kendali hormon. Pengaruh stimulasi kelenjar sinus X-organ kompleks yang terletak di eyestalks, dan efek hambat Y-organ di haematopoiesis krustasea telah dibahas oleh Ghiretti-Magaldi (1977); Khazraeenia dan Khazraiinia (2009). Dalam setiap bintil organ hemopoietic, batang-sel atau hemoblasts mengalami mitosis teratur untuk memproduksi berbagai macam hemosit (Bauchau 1981; Johansson (2000); Khazraeenia dan Khazraiinia (2009). Sebuah pengendalian hormonal dari kegiatan hemopoietic ini telah diteliti dengan benar pada kepiting, sejak pengangkatan kelenjar sinus di eyestalks ditandai dengan peningkatan mitosis. Ini adalah mungkin di bawah pengaruh organ-Y, setelah dibebaskan dari hambatan kelenjar sinus (MandongaBoy 2014). Berbeda dengan hasil penelitian Hernandez et al. (2008) yang mengemukakan bahwa jumlah hemosit tidak dipengaruhi secara signifikan oleh EA atau seks, meskipun ada kecenderungan ke arah penurunan jumlah hemosit dengan derajat EA (Gambar 2.).

Gambar 2. Total hemocytes count (THC) pada Litopenaeus vannamei yang diablasi secara unilateral (U), bilateral (B) dan kontrol (C).

        Selanjutnya dilaporkan juga bahwa kadar proPO dan aktivitas PO jauh lebih rendah pada udang dengan bilateral ablasi dibandingkan dengan perlakuan kontrol atau unilateral ablasi udang (efek utama dari EA, Pb0.05;. Gambar 3. a dan b) dan efek ini adalah independen dari jenis kelamin udang.

Gambar 3. Pengaruh ablasi tangkai mata terhadap kadar prophenoloxidase (proPO) hemolymph dan phenoloxidase activity (PO) pada Litopenaeus vannamei yang di ablasi secara unilateral (U), bilateral (B) dan kontrol (C).

      Fungsi sistem pertahanan humoral dan seluler  telah diselidiki secara luas pada krustasea dan serangga (untuk review lihat Olafsen 1988; Johanson dan Söderhäll 1989; Vargas-Albores 1995). Penelitian terbaru pada serangga menunjukkan bahwa beberapa sistem neuroendokrin memodulasi sistem pertahanan humoral dan seluler. Unilateral ablasi pada Farfantepenaeus  paulensis betina menyebabkan penurunan total hemosit (Perazzolo et al. 2002; Hernandez et al. 2008). Dalam investigasi yang dilakukan oleh Maggioni et al. (2004) pada L. vannamei, diperoleh penurunan yang tidak signifikan. Dalam penelitian tersebut, non signifikan tren, terkait dengan tingkat EA hanya diperoleh pada jantan. Pada Drosophila melanogaster, Sorentino et al. (2002) menemukan bahwa kekurangan dari ecdysteroids membahayakan respon imun selular, mengurangi hemosit proliferasi dan enkapsulasi.

          Penurunan hemocyte tidak signifikan pada udang dengan bilateral ablasi, terutama pada jantan,  juga dapat berkontribusi pada berkurangnya aktivitas proPO yang dihasilkan oleh semi-granular dan granular hemocyte (Sritunyalucksana dan Söderhäll, 2000 dalam Hernandez et al. 2008). Selain itu, penurunan aktifitas PO pada udang dengan bilateral ablasi dapat berakibat langsung terhadap rendahnya level proPO atau menurunya aktifitas (MandongaBoy 20114) proPO-activating enzyme, suatu proteinase serine yang mengubah proPO menjadi PO (Sritunyalucksana dan Söderhäll, 2000). Hernandez et al. (2008)  menemukan pengurangan total PO (proPO + PO) pada F. paulensis yang diablasi secara unilaterall, tetapi  Maggioni et al. (2004) tidak menemukan pengaruh ini pada L. vannamei. Dalam penelitian yang dilakukan oleh Hernandez et al. 2008 dikemukakan bahwa pengurangan total proPO hanya terjadi pada udang dengan bilateral ablasi.

            Selain partisipasi PO dalam sistem pertahanan internal, enzim berpartisipasi dalam proses melanization cuticular pada krustasea dan serangga. Percepatan proses molting yang disebabkan oleh EA mungkin menghasilkan peningkatan produksi melanin melalui PO sistem. Namun, tidak diketahui apakah PO dalam hemocyte berpartisipasi dalam penggabungan melanin dalam exoskeleton. Pada serangga, PO bertanggung jawab untuk melanization cuticular yang diproduksi dalam epidermis (Hiruma dan Riddiford 1993 dalam Hernandez et al. 2008).